掃描電鏡作為材料科學(xué)、地質(zhì)學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的重要分析工具，其成像質(zhì)量高度依賴于樣品制備的規(guī)范性。本文將從樣品清潔、導(dǎo)電處理、固定方法等核心環(huán)節(jié)出發(fā)，系統(tǒng)梳理SEM掃描電鏡制樣的關(guān)鍵要點(diǎn)，助您獲得清晰穩(wěn)定的微觀圖像。

一、樣品清潔：去除污染，保留真實(shí)形貌

1. 物理清潔方法

吹掃法：使用高壓氮?dú)饣驂嚎s空氣吹除樣品表面松散顆粒，適用于金屬、陶瓷等硬質(zhì)材料。注意控制氣壓（通常0.2-0.5 MPa），避免損傷微納結(jié)構(gòu)。

超聲清洗：針對(duì)附著有機(jī)物或細(xì)小顆粒的樣品（如半導(dǎo)體芯片、生物切片），可置于無(wú)水乙醇或去離子水中超聲處理（頻率20-40 kHz，時(shí)間1-3分鐘）。需注意：脆性材料（如玻璃）可能因超聲產(chǎn)生裂紋。

2. 化學(xué)清潔技巧

酸洗法：金屬樣品可用稀鹽酸（5%-10%）或硝酸溶液浸泡，去除氧化層或銹蝕。例如，鐵基樣品浸泡30秒后立即用去離子水沖洗，避免過(guò)度腐蝕。

酶解處理：生物樣品（如植物組織、細(xì)胞）需先用胰蛋白酶或膠原酶消化表面蛋白質(zhì)，再通過(guò)梯度乙醇脫水。此步驟可減少電子束照射時(shí)的碳化現(xiàn)象。

二、導(dǎo)電處理：解決充電效應(yīng)的核心手段

1. 金屬鍍膜法（*常用）

鍍金/鉑：通過(guò)濺射儀或蒸發(fā)儀在樣品表面沉積10-20 nm厚度的金屬層。適用于非導(dǎo)電樣品（如聚合物、陶瓷）。注意控制鍍膜時(shí)間，過(guò)厚可能導(dǎo)致細(xì)節(jié)模糊。

碳鍍膜：對(duì)需要保持原始化學(xué)信息的樣品（如礦物、催化劑），碳膜可避免金屬元素干擾能譜分析（EDS）。

2. 導(dǎo)電膠固定法

適用場(chǎng)景：塊狀或粉末樣品（如地質(zhì)標(biāo)本、納米顆粒）。將樣品嵌入導(dǎo)電膠（銀漿或碳膠）中，確保膠層厚度均勻（通常0.5-1 mm），避免電荷積累。

3. 低真空模式（環(huán)境SEM）

原理：通過(guò)引入少量氣體（如水蒸氣）中和電荷，適用于含水樣品（如生物組織）或無(wú)法鍍膜的樣品。成像分辨率可能略低于高真空模式。

三、樣品固定與干燥：避免形變與污染

1. 剛性樣品固定

金屬/陶瓷：使用導(dǎo)電膠直接粘附在樣品臺(tái)，或用銅環(huán)夾持。對(duì)于微小樣品（如芯片焊點(diǎn)），可用導(dǎo)電膠帶輔助定位。

脆性材料（如玻璃、半導(dǎo)體）：建議用石蠟或低熔點(diǎn)合金（如伍德合金）鑲嵌，避免機(jī)械應(yīng)力導(dǎo)致開(kāi)裂。

2. 柔性/粉末樣品處理

生物組織：需經(jīng)固定（如戊二醛交聯(lián)）、脫水（梯度乙醇）、臨界點(diǎn)干燥（CO?替代）后，粘附于導(dǎo)電膠表面。例如，植物葉片需在脫水至****乙醇后，用六甲基二硅氮烷（HMDS）替換，防止收縮變形。

粉末樣品：分散于導(dǎo)電膠或雙面膠表面，用洗耳球輕吹去除松散顆粒。對(duì)于超細(xì)粉末（如納米材料），可滴加少量分散劑（如十二烷基硫酸鈉）輔助分散。

四、尺寸與形狀要求：適配電鏡腔體

1. 樣品尺寸限制

常規(guī)掃描電鏡：樣品高度通常不超過(guò)10 mm（部分機(jī)型允許20 mm），直徑需小于樣品臺(tái)尺寸（常見(jiàn)30-50 mm）。超大型樣品可通過(guò)切割或聚焦離子束（FIB）減薄。

微區(qū)分析：需制備截面樣品（如金屬斷口、涂層界面），通過(guò)鑲嵌樹(shù)脂固化后，用砂紙打磨至目標(biāo)區(qū)域，再拋光至鏡面。

2. 形狀優(yōu)化技巧

尖銳邊緣處理：對(duì)樣品邊緣的毛刺或銳角，可用導(dǎo)電膠填充或輕微打磨，避免電子束集中導(dǎo)致局部過(guò)熱。

孔隙結(jié)構(gòu)保護(hù)：多孔材料（如泡沫金屬、生物支架）需在鍍膜前用低表面張力液體（如氟利昂）浸潤(rùn)，防止鍍膜時(shí)液體表面張力破壞孔隙結(jié)構(gòu)。

五、特殊樣品制樣案例

1. 含水樣品（如細(xì)胞、水凝膠）

快速冷凍法：將樣品投入液氮中速凍，再在冷凍干燥機(jī)中升華去除水分。此方法可保留原始形貌，但需配合低溫SEM掃描電鏡使用。

替代法：用聚乙烯醇（PVA）或聚乳酸（PLA）包埋樣品，干燥后溶解包埋劑，形成中空結(jié)構(gòu)供觀察。

2. 磁性樣品（如永磁體、鐵粉）

消磁處理：將樣品置于交變磁場(chǎng)中逐步退磁，避免磁場(chǎng)干擾電子束路徑。消磁后立即鍍膜并放入電鏡，防止重新磁化。

隔磁措施：在樣品臺(tái)與電鏡腔體間加裝μ金屬屏蔽層，減少磁場(chǎng)泄漏。

六、制樣常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案

1. 圖像出現(xiàn)條紋或閃爍

原因：樣品充電導(dǎo)致電子束偏轉(zhuǎn)。

解決：增加鍍膜厚度至20 nm以上，或改用低真空模式觀察。

2. 粉末樣品脫落

原因：導(dǎo)電膠粘附力不足。

解決：使用雙面導(dǎo)電膠帶，或預(yù)先在膠面噴涂一層薄金增強(qiáng)粘性。

3. 生物樣品收縮變形

原因：脫水不徹底或干燥方式不當(dāng)。

解決：采用臨界點(diǎn)干燥法，或替換為叔丁醇凍干技術(shù)。

掃描電鏡制樣是一門融合科學(xué)與藝術(shù)的技藝，需根據(jù)樣品特性靈活調(diào)整步驟。從基礎(chǔ)清潔到導(dǎo)電處理，從尺寸適配到特殊案例，每一個(gè)細(xì)節(jié)都可能影響*終成像質(zhì)量。掌握這些要點(diǎn)，不僅能提升數(shù)據(jù)可靠性，更能為材料失效分析、納米結(jié)構(gòu)表征等研究提供堅(jiān)實(shí)支撐。在追求高分辨率的同時(shí)，牢記“制樣決定成敗”的準(zhǔn)則，方能充分發(fā)揮SEM掃描電鏡在微觀世界的探索潛力。